小鼠白細胞介素18ELISA檢測試劑盒分析方法

小鼠白細胞介素18ELISA檢測試劑盒分析方法

1、血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
5、保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

小鼠白細胞介素18ELISA檢測試劑盒分析方法
ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
1.不同廠家生產的試劑盒因生產工藝和操作方法略有不同，務必按照所用試劑盒嚴格操作，否則容易產生檢測結果的不確定性.
2.若不同批號人ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液)，或不同試劑的不同組分進行交叉使用，有可能出現顯色淺或本底高，花板等情形。
3.反應時間的誤差，做大量標本時，Di一孔和最后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
4.臨界值附近標本波動為正常現象，任何試劑均不可避免。可以考慮將標本做奇數次復檢。

準備試劑，樣品和標準品 
 
加入準備好的樣品和標準品，37℃反應30分鐘
 
洗板4次，加入酶標試劑，37℃反應30分鐘
 
洗板4次，加入顯色液A、B，37℃顯色15分鐘
 
加入終止液
 
15分鐘之內讀OD值